蛋白质纯化与分析-科普

蛋白质是由氨基酸组成的一类高分子有机化合物,是人体的必需营养素。蛋白质的英文是protein,源于希腊文的proteios,是“头等重要”意思,表明蛋白质是生命活动中头等重要的物质。蛋白质是细胞组分中含量最为丰富、功能最多的高分......查看详细>>

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蛋白质是生命活动的物质基础,也是生物体内的功能性大分子。随着分子生物学、结构生物学、基因组学等研究的不断深入,人们意识到仅靠基因组的序列分析来阐明生命活动的现象和本质是远远不够的,只有从蛋白质组学的角度来研......查看详细>>

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能从成千上万种蛋白质混合物中纯化出一种蛋白质的原因,是不同的蛋白质在物理、化学和生物学性质方面有着极大的不同,这些性质是由蛋白质氨基酸的排列序列和数目不同造成的。连接在多肽主链上的氨基酸残基可以是带正电荷或......查看详细>>

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按照蛋白质分离纯化的依据,蛋白质的纯化方法可按照分子大小、形状、带电性质及溶解度等主要因素进行分类。按分子大小和形态分为差速离心、超滤、分子筛及透析等方法;按溶解度分为盐析、溶剂抽提、分配层析、逆流分配及结......查看详细>>

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蛋白质纯化的总目标是设法增加蛋白质样品的纯度或比活力,对纯化的要求是以合理的效率、速度、收率和纯度,将需要的蛋白质从细胞的全部其他成分,特别是不想要的杂蛋白中分离出来,同时仍保留它该有的生物学活性和化学完整性......查看详细>>

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蛋白质是一种极具多相性的生物大分子,离开其天然环境,蛋白质分子极不稳定,容易变性,另外,在细胞和提取液中蛋白质的性状也不尽相同。从正常生物基质中提取各种蛋白质均需要有特定的条件。如果不能满足这一条件,蛋白质将很......查看详细>>

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能抵御少量的酸、碱,或稀释少量倍数时,体系的pH基本不变的溶液称为缓冲溶液。缓冲溶液的缓冲对一般是由共轭酸碱对或两性物质组成。缓冲液可以抗衡蛋白质溶液中pH的改变,选择合适的缓冲液对于维持一定pH下蛋白质的稳定及保......查看详细>>

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不同的蛋白质在不同的温度下具有不同的溶解度和活性。大多数蛋白质在低温(如0℃左右)下比较稳定,故分离操作一般在0℃或更低温度下进行。例如,在生产人绒毛膜促性腺激素(HCG,一种糖蛋白)制品时,一定要在低温下进行。当温度低......查看详细>>

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在蛋白质提取液中通常包含0.1～0.2mol/L的KCl或NaCl来模拟生理状况下的离子强度。一般来说,离子强度较低的中性盐溶液有促进蛋白质溶解、保护蛋白质活性的作用,离子强度过高则会引起蛋白质发生盐析作用。但是,蛋白质的性质各不......查看详细>>

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溶液中的金属离子影响所提取蛋白质的活性和稳定性。如果蛋白质的活性或稳定性需要金属离子来维持,这时应当注意缓冲液对金属离子的亲和性,避免使用Tris缓冲液作为提取液。在100mmol/LTris缓冲液中加入2mmol/LMn2+则29%的金属离子被......查看详细>>

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