本方法是使用寡核苷酸引物和大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段来标记DNA片段。本法除可替代缺口平移产生均一标记的探针外,还在许多方面优于缺口平移方法。(1)当使用[α-32P]dCTP(比活性1.11×1014Bq/mmol)时,在一个30min的反应中就可以常...[继续阅读]

    [1]向正华,刘厚奇.核酸探针与原位杂交技术[M].第二军医大学出版社,2001.[2]WalkerJA,QuirkeP.Viewingapoptosisthrougha‘TUNEL’[J].TheJournalofPathology,2001,195:275-276.[3]XiaolinDeng,YunWang,JenneyChou,etal.Methamphetaminecauseswidespreadapoptosisinthemousebrain:evidencefromusi...[继续阅读]

    CGH是1992年首先由Kallioniemin发明并应用于检测细胞基因组改变的一种分子细胞遗传学方法。其原理是将待测细胞DNA与正常对照DNA分别用二种不同荧光染料标记(待测标本DNA一般用绿色标记,正常对照DNA用红色标记),然后将标记的DNA等量混...[继续阅读]

    一、非特异性染色的主要因素组织的非特异性染色的机制很复杂,其产生的原因主要可分以下几点:(1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去引起非特异性染色。(2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形...[继续阅读]

    细胞凋亡时在形态上将发生明显的改变,可以通过显微镜直接观察或荧光染料染色后荧光显微镜观察。检测细胞凋亡常用的荧光染料有:丫啶橙、碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33258和Hoechst33342、溴化乙啶(EB)等。DAPI、Hoechst33258和Hoechst33342等...[继续阅读]

    [1]AndreeffM,PinkelD.IntroductiontoFluorescenceInSituHybridization:PrinciplesandClinicalApplications[J].USA:WILEY-LISS,1999:3.[2]GuanXY,ZhangHE,BitterM,etal.Chromosomearmpaintingprobes[J].NatureGenet,1996,12:10.[3]TannerMM,GrenmanS,KoulA,etal.Frequentampl...[继续阅读]

    自从1953年Watson和Crick发现DNA的双螺旋分子构象以来,随着DNA重组技术的建立和发展,以及人类基因组计划的完成和后基因组计划的实施,人们正在不断地揭开DNA的奥秘。一、DNA的结构(一)DNA的一级结构DNA是以4种脱氧核苷酸为基本单元组...[继续阅读]

    抗原与抗体的反应统称为免疫学反应。在体内进行的抗原抗体反应称为免疫反应,在体外进行的抗原抗体反应称为血清学反应。由于抗原的物理性状不同,参加反应的因素不同,使在抗体抗原反应时,可表现出各种形式的反应。抗原与抗...[继续阅读]

    [1]姜泊,张亚历,周殿元.分子生物学常用实验方法[M].北京:人民军医出版社,1995:15-23.[2]StruhlK.ArapidmethodforcreatingrecomninantDNAmolcules[J].BioTechniques,1985:3:452.[3]鄂征.组织培养和分子细胞学技术[M].北京:北京出版社,1994:299-323.[4]蔡文琴,王伯沄.实...[继续阅读]

    一、抗原暴露和修复的意义在进行常规石蜡切片或存档标本的回顾性研究时,必须进行酶消化或热处理诱导抗原的修复来提高免疫组织化学检测的敏感性,使许多原来仅表达在冷冻切片上的抗原能用于石蜡切片。主要通过酶消化使抗原...[继续阅读]