通过缺口平移方法、随机引物方法、RNA体外转录方法、接尾或激酶方法而合成的放射性标记探针在标记后必须纯化,以除去可能干扰杂交反应的未掺入标记物、酶和盐。未掺入的标记核苷酸能严重引起非特异本底信号。一般纯化标记...[继续阅读]

    免疫组织化学技术是基础形态学研究和临床疾病诊断中最为常用的手段,它的成功与否与标本(组织和细胞)的制备有密切的关系。本章主要包括标本的采集、组织和细胞的培养、标本的固定保存、切片的制备,此外,还简单介绍了染色体...[继续阅读]

    免疫组织化学是组织化学吸收了免疫学的理论和技术发展起来的一门重要的方法学,在现代生物学领域中得到广泛应用,尤其在基础医学、预防医学和临床医学的诊断中发挥着重要作用。免疫酶化学是免疫组织化学的一个重要组成部分...[继续阅读]

    一、染色体的基本知识体细胞的染色体是46个,23对,其中22对是常染色体,一对是性染色体(图3-1),男性的一对为XY,女性的一对为XX。染色体的形态随着细胞周期的不同而有所改变,在光学显微镜下所看到的染色体是细胞分裂中期染色体(...[继续阅读]

    一、标记方法(一)FITC标记抗体的方法当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是赖氨酸的E-氨基与荧光素的硫碳胺键(Thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合...[继续阅读]

    核酸的发现已有近150年的历史,但人们对它真正有所认识不过是近60年的事。远在1865年,孟德尔(GregorMendel,1822—1884)通过豌豆实验在《植物的杂交试验》一书的分离定律和自由组合定律中,提出生物性状的遗传是由遗传因子决定的。18...[继续阅读]

    一、直接法这是最简便、快速的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成特异性荧光抗体。直接用于细胞或组织抗原的检查,此法特异性高,其缺点是一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差(图5-11)。但非常实用,应用也广泛,例如...[继续阅读]

    一、变性不论是DNA还是RNA,若其二级结构和三级结构受到物理化学因素的破坏而解体,但其一级结构核苷酸间共价键并不断裂,这就是核酸的变性。引起核酸变性的因素很多,常见的有加热、酸、碱、乙醇、丙酮、尿素、酰胺等。通常...[继续阅读]

    组成核酸的元素有C、H、O、N、P等,其中N含量为15%～16%,磷含量为9%～10%。由于核酸分子的磷含量比较恒定,因此核酸定量测定的经典方法是以测定磷含量百分比来代表核酸量。核酸经水解可得到核苷酸,核苷酸是核酸的基本单位,核酸就...[继续阅读]

    细胞凋亡时的主要生化特征是其染色质发生浓缩,染色质DNA首先在内源性核酸水解酶的作用下降解为50～300kb的大片段,然后大约30%的染色体DNA在Ca2+和Mg2+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180～200bp整数倍的寡...[继续阅读]