聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板...[继续阅读]

    一、离心基本原理当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时,重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度不仅与微粒的大小、形态和密度有关,而且与重力场...[继续阅读]

    一、定磷法测定核酸含量(一)目的和要求掌握定磷法测定核酸含量的基本原理。(二)基本原理在酸性环境中,定磷试剂中的钼酸铵以钼酸形式与样品中的磷酸反应生成磷钼酸,当有还原剂(如抗坏血酸、1,2,4—氨基萘酚磺酸)存在时,磷钼酸...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 学习核酸杂交的原理。2. 了解Southern杂交的基本操作过程。二、基本原理如果把不同的DNA链放在同一溶液中作变性处理,或把单链DNA与RNA放在一起,只要有某些区域(当然也可以是链的大部分)有成立碱基的可能,它们之...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 掌握血清谷丙转氨酶活性测定的原理和方法。2. 了解血清谷丙转氨酶活性的临床意义。二、实验原理丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminasem,ALT),又称谷丙转氨酶(glutamate-pyruvate transaminase,GPT),能催化α-酮戊二酸与丙氨酸...[继续阅读]

    为了定性或定量检测目的核酸,在进行核酸杂交时,将一段已知序列的核酸作上标记,去探测或追踪所要研究的目的核酸,这段带有标记的核酸分子被称为探针(probe)。探针的标记是核酸分子杂交技术中重要的环节之一。理想的核酸探针分...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 了解限制性内切酶的特点与用途。2. 掌握从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本原理和操作方法。二、基本原理限制性核酸内切酶(restriction enzyme),又称限制性内切酶,是指能识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 了解脂肪酸β-氧化作用的机制。2. 掌握测定β-氧化作用的方法及其原理。二、基本原理脂肪酸的分解代谢主要是通过β-氧化作用进行的。β-氧化过程包括一系列反应,最终形成乙酰CoA。乙酰CoA可以进一步参加三羧酸...[继续阅读]

    一般粗提液的体积都比较大,应经过进一步浓缩和分离纯化处理。常用的浓缩和纯化方法和技术有沉淀法(包括盐析、有机溶剂沉淀、选择性沉淀等)、透析、超过滤、冷冻干燥、离心、吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和...[继续阅读]

    一、基本原理层析技术的基本原理是使用混合物中各组分在两相(固定相和流动相)间进行分配。其中,固定相是固体物质或者是固定于固体物质上的成分;流动相即可以流动的物质,如水和各种溶媒。当待分离的混合物随流动相通过固定...[继续阅读]