JTC-801抑制结肠癌增殖迁移和促进凋亡机制探讨

摘要： 目的JTC-801是孤啡肽受体NOP[Nociceptin/orphaninFQ(N/OFQ)peptide]受体拮抗剂,适用于与神经损伤相关的神经性疼痛和异常性疼痛,在肿瘤中的研究鲜见。本研究探讨JTC-801对结肠癌HCT116及HT-29细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并探讨相关机制。方法采用JTC-801加药处理HCT116及HT-29细胞,用CCK8法、Transwell实验和细胞流式凋亡检测实验分别检测HCT116细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡;采用蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白以及PI3K信号通路相关蛋白表达。结果CCK8实验表明,JTC-801显著抑制了HCT116及HT-29细胞增殖能力,并呈一定的剂量依赖性和时间依赖性。Transwell实验结果表明,10μmol/LJTC-801明显抑制了HCT116细胞迁移能力,与对照组迁移细胞数分别为44±2和96±5,t=16.72,P=0.0001;也抑制了HT-29细胞迁移能力,与对照组迁移细胞数分别为45±4和93±7,t=10.32,P=0.005。同样10μmol/LJTC-801显著抑制了HCT116细胞,与对照组穿膜细胞数分别为21±5和43±3,t=6.54,P=0.0028;也抑制了HT-29细胞,与对照组穿膜细胞数分别为23±3和40±2,t=8.17,P=0.0012。细胞流式凋亡检测实验结果表明,10μmol/LJTC-801促进HCT116细胞凋亡,凋亡率为(13.74±0.42)%和(4.73±0.33)%,t=29.23,P<0.001;也促进HT-29细胞凋亡,凋亡率为(18.59±0.39)%和(8.51±0.57)%,t=25.28,P<0.001。且抗凋亡相关蛋白Bcl-2明显下降,同时促凋亡蛋白Bax及ActiveCaspase3蛋白水平则显著上升,P<0.05;10μmol/LJTC-801还显著抑制了p-Akt、p-mTOR及下游分子p70s6k蛋白的表达水平,均P<0.01。结论JTC-801可以抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,对结肠癌的发生发展进程产生重要作用。其作用可能通过影响PI3K信号通路活化实现。 ... （共5页）