正交设计法优化川木通RAPD-PCR体系研究

摘要： 目的确定川木通RAPD-PCR反应各因素的最佳水平,最终确定RAPD-PCR反应的最佳反应条件。方法采用正交设计L16(45)在4个水平上对川木通类植物进行RAPD-PCR进行试验。两次结果分别用统计软件M INITAB进行分析。结果最终确定RAPD-PCR反应的最佳反应条件为:20μl体系,其中含1×PCR buffer,2.5 mmol/L MgC l2,0.15mmol/L dNTPs,1.0 UTaq酶,0.5μmol/L 10-m er引物,50 ng模板DNA,最终确定退火温度36℃。同时发现Taq酶对反应体系影响最大。结论建立了可靠的反应体系,为该类药材的分子鉴定奠定了基础。 ... （共3页）