非必需氨基酸和β-巯基乙醇对神经干细胞增殖的影响

摘要： 目的观察非必需氨基酸(NEAA)和β-巯基乙醇对神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法取孕龄为14.5d的雌鼠,处死后提取NSCs并培养,取5~7代的NSCs用于实验,将NSCs细胞使用传代培养基培养,并分为四组,对照组:加入磷酸盐缓冲液(PBS)12μL;NEAA组:加入NEAA10μL,PBS2μL;β-巯基乙醇组:加入β-巯基乙醇2μL,PBS10μL;NEAA+β-巯基乙醇组:加入NEAA10μL,β-巯基乙醇2μL。通过细胞计数法计算NSCs的增殖速度,噻唑蓝(MTT)法测定NSCs增殖率,RT-PCR法测定NSCs中凋亡相关基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的表达,免疫组化法对NSCs进行鉴定并测定NSCs向神经元和星形胶质细胞的分化潜能。结果与对照组比较,NEAA组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3mRNA降低(P<0.05或<0.01);β-巯基乙醇组及NEAA+β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3mRNA、TUJ-1阳性细胞百分比、GFAP阳性细胞百分比降低,Nestin升高(P<0.05或<0.01)。与NEAA组比较,NEAA+β-巯基乙醇组各项指标差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01);与β-巯基乙醇组比较,NEAA+β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3mRNA降低(P<0.05或<0.01)。结论NEAA和β-巯基乙醇均能促进NSCs增殖,联合使用起协同作用。 ... （共3页）