高毒力肺炎克雷伯菌wzc基因敲除株的构建及其生物学特性分析

摘要： 目的 构建高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）KPN234的wzc基因敲除株，研究wzc基因对细菌荚膜及毒力的影响。方法 设计靶向wzc中的sgRNA，构建CRISPR/Cas9基因敲除载体并采用电击转KPN234，经安普霉素和卡那霉素双抗筛选及质粒丢失后，获得wzc基因敲除株；采用PCR及全基因组测序确认基因敲除及无脱靶后，Western blot确认敲除菌株不再表达Wzc蛋白。绘... ... （共8页）