实时荧光定量PCR技术的理论研究及其医学应用.pdf

所属栏目:临床医学

【日期】:2010-01-08
【关键词】:实时荧光定量PCR;;原理;;应用;;进展;;综述文献

【摘要】:背景:实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。目的:对实时荧光定量PCR的理论进行研究并探讨其在医学方面的应用和进展。方法:以real-time fluorescence quota PCR,theorem,application为检索词,检索PubMed数据库(2000-01/2008-12)。以实时荧光定量PCR,原理,应用为检索词,检索万方数据库(2000-01/2008-12),清华同方中文系列数据库(2000-01/2008-12)。文献检索语种限制为英文和中文。以细胞因子和肿瘤耐药基因的表达为评价指标。纳入实时荧光定量PCR技术的方法学研究和实时荧光定量PCR技术的医学应用研究。排除重复性研究和Meta分析。结果与结论:实时荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高、全封闭反应等优点,成为分子生物学研究中的重要工具。实时荧光定量PCR的应用范围非常广泛,包括mRNA表达的研究、DNA拷贝数的检测、单核苷酸多态性的测定等,已广泛应用于医学临床,它能对结核分枝杆菌、乙型、丙型肝炎、爱滋病病毒、淋球菌、沙眼衣原体等病原体进行准确的定量检测。其定量范围极宽,无需做梯度稀释,特异性更强,克服了假阳性。由于传统的PCR技术不能准确定量,使其在实际应用方面受到很大限制。因此,对PCR产物进行准确定量,尤其是病毒性病原的动态监控,成为迫切需要。


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